KHYG-1 (NK cell) JCRB0156
一、基本資訊（Identity）
| 項目 | 內容 |
|---|---|
| 細胞株名稱 | KHYG-1 |
| 細胞庫編號 | JCRB0156 |
| 物種 | Homo sapiens |
| 來源疾病 | Aggressive NK cell leukemia |
| 來源組織 | 外周血 |
| 捐贈者 | 女性，45 歲 |
| 建立者 / 年份 | Yagita et al. / 1997 |
| 細胞型態 | NK-like lymphoid leukemia cell line |
| 生長方式 | 懸浮型（non-adherent） |
二、形態與一般特徵（Morphology & General Features）
| 項目 | 描述 |
|---|---|
| 細胞形態 | 淋巴樣，大顆粒淋巴細胞（LGL） |
| 細胞核 | 大核、染色質粗、可見核仁 |
| 胞質特徵 | 含豐富嗜鹼性顆粒 |
| 生長特性 | 高度依賴細胞密度 |
| 冷凍復甦 | 對 freeze–thaw 敏感 |
三、免疫表型（Immunophenotype）
| 分類 | 標記 |
|---|---|
| 陽性（+） | CD2, CD7, CD8αα, CD33, CD56, CD122 (IL-2Rβ), CD132 (γc), cytoplasmic CD3ε |
| 陰性（−） | Surface CD3, CD16, CD1 |
| CD25（IL-2Rα） | 原始文獻為陰性；JCRB 實測部分批次可檢出 |
| TCR / Ig 基因 | Germline configuration（無重組） |
📌 實務提醒：若研究 IL-2 受體或訊號通路，需留意 CD25 批次差異。
四、培養條件（Culture Conditions）
| 項目 | 建議條件 |
|---|---|
| 基礎培養基 | RPMI-1640 |
| 血清 | FBS 10%（狀況差可提升至 20%） |
| 細胞激素 | Recombinant human IL-2 |
| IL-2 建議濃度 | 100 U/mL（不穩定時 200 U/mL） |
| 培養溫度 | 37 °C |
| CO₂ | 5% |
| pH 指標 | Phenol red 呈橘色最佳 |
| 培養方式 | 高密度懸浮培養 |
五、生長與繼代特性（Growth Characteristics）
| 項目 | 說明 |
|---|---|
| 建議起始密度 | 1–5 × 10⁵ cells/mL |
| 倍增時間 | 約 25–54 小時（依 LOT 與密度） |
| 繼代方式 | 每 3–4 天 1:4 稀釋 |
| 換液原則 | 只加不全換（避免稀釋自分泌因子） |
| 特殊技巧 | Slant culture 可改善解凍後狀況 |
六、生物學與功能特性（Biological Functions）
| 項目 | 內容 |
|---|---|
| NK 活性 | 高自然殺手細胞細胞毒性 |
| 殺傷機制 | Perforin / Granzyme（特別是 Granzyme M） |
| 標的細胞 | K562、多種白血病細胞 |
| IL-2 依賴性 | 高度依賴 IL-2 維持增殖與活性 |
| IFN-γ 產生 | 可分泌 |
七、分子與基因特徵（Molecular Characteristics）
| 項目 | 描述 |
|---|---|
| p53 狀態 | 點突變（codon 248, C→T） |
| 與原始腫瘤一致性 | 是 |
| STR 鑑定 | 部分 LOT 提供（可用於身份確認） |
八、研究應用（Applications）
| 類別 | 適用性 |
|---|---|
| NK 細胞功能研究 | ⭐⭐⭐⭐⭐ |
| Cytotoxicity assay | ⭐⭐⭐⭐⭐ |
| IL-2 訊號研究 | ⭐⭐⭐⭐ |
| 腫瘤免疫研究 | ⭐⭐⭐⭐ |
| NK 細胞免疫治療前臨床 | ⭐⭐⭐⭐ |
九、操作注意事項（Critical Notes）
| 項目 | 重點 |
|---|---|
| 細胞密度 | 低密度＝高風險 |
| 換液頻率 | 過度換液會抑制生長 |
| IL-2 來源 | 不同廠牌 Unit 不可直接等值 |
| 官方建議 | 優先使用 JCRB 指定之 PeproTech IL-2 |
| 培養穩定性 | 對環境變動高度敏感 |
OSC-19人類舌部鱗狀細胞癌 JCRB0198
📌 基本細胞資料 — OSC-19（JCRB0198）
| 項目 | 內容 |
|---|---|
| 細胞株名稱 | OSC-19 |
| 登錄編號 | JCRB0198 |
| 物種 | Homo sapiens |
| 細胞類型 | Squamous cell carcinoma cell line（鱗狀細胞癌） |
| 原發位置 | 舌（tongue）腫瘤 |
| 初代採樣患者 | 61 歲男性（Japanese） |
| 是否有轉移 | 是（頸部淋巴結） |
| 細胞形態 | 上皮樣（epithelial-like） |
| 基本特性 | Growth inhibited by EGF（EGF 抑制生長） |
🧪 培養條件（Culture Conditions）
| 項目 | 條件 |
|---|---|
| 基礎培養基 | 1:1 Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium + Ham’s F-12 |
| 補充 | 常用可加血清；原則可 serum-free |
| 接種密度 | 約 1.0 × 10⁴ – 3.3 × 10⁴ cells/mL |
| 繼代方法 | 0.01% trypsin + 0.01% EDTA |
| CO₂ 濃度 | 5% |
| 溫度 | 37°C |
| 附註 | 可用 soybean trypsin inhibitor 終止酵素作用 |
🧬 生物學特性（Biological Features）
| 項目 | 描述 |
|---|---|
| 腫瘤類型 | 舌部鱗狀細胞癌（Squamous Cell Carcinoma） |
| 上皮性 | Epithelial-like morphology |
| 生長反應 | EGF 在 1–100 ng/mL 範圍 抑制生長 |
| 軟瓊脂生長 | 不在 soft agar 形成克隆 |
| 病毒檢測 | CMV / parvoB19 / HCV / HTLV-1/2 / EBV / HBV / HIV-1/2 / HHV-7 / HAV 均未呈陽性（或未測試） |
🧠 技術與研究應用（Use Cases）
| 研究方向 | 適用度 |
|---|---|
| 腫瘤生物學 | ⭐⭐⭐⭐ |
| 舌部/口腔鱗狀細胞癌模型 | ⭐⭐⭐⭐⭐ |
| 上皮生長因子（EGF）訊號研究 | ⭐⭐⭐⭐ |
| 細胞增殖與致癌因子分析 | ⭐⭐⭐⭐ |
| 無血清培養條件評估 | ⭐⭐⭐ |
🔧 操作建議（Practical Notes）
✔ 血清與無血清：細胞可在 serum-free 下培養，但加血清（FBS）常提高存活率。
✔ EGF 敏感性：EGF 不促進生長，反而抑制；實驗設計需注意此特性。
✔ 冷凍復甦：Viability 會隨批次與起始密度變動，建議按官方 LOT 參數調整 thaw protocol。
🏁 總結一覽
| 類別 | 亮點 |
|---|---|
| 細胞標識 | 舌部鱗狀細胞癌人源細胞系 |
| 模型價值 | 高 — 用於口腔癌與上皮癌研究 |
| 培養特色 | 可 serum-free；EGF 反應抑制 |
| 操作難度 | 中等（需注意增殖與生長條件） |
| 可適用方向 | 腫瘤訊號通路、生長因子測試、致癌機制分析 |