CytoFLEX Nano 流式細胞儀 是一款專為 奈米級顆粒（如細胞外修飾囊泡）設計的高解析度分析儀器。該設備具備卓越的靈敏度，能偵測直徑介於 40 奈米至 1 微米 之間的微粒，並提供多達 六種螢光通道 與五個側向散射參數。提供的資訊涵蓋了從儀器啟動、自動化品管（QC）、靈敏度監控到樣本製備與稀釋的完整流程，旨在解決傳統流式細胞術在微小粒子偵測上的限制。此外，CytExpert 軟體 在數據擷取、補償調整及預防樣本「群聚效應」（swarming）確保了研究結果的精確性。
CytoFLEX nano 透過一系列創新的光學設計、流體系統改良以及專門針對奈米級微粒優化的偵測參數，克服了傳統流式細胞儀在靈敏度與解析度上的限制。以下是其主要的技術突破與解決方案：
重新設計的光學與流體系統 (Redesigned Optics and Fluidics)
1. 重新設計的光學與流體系統 (Redesigned Optics and Fluidics) 傳統流式細胞儀通常無法有效偵測小於 100-200 nm 的微粒。CytoFLEX nano 通過完全重新設計的光學和流體系統，最大化了訊號偵測能力。
• 極致靈敏度： 它能夠偵測小至 40 nm 的聚苯乙烯微粒（Polystyrene beads）,。針對生物樣本，如細胞外囊泡（EVs），已證實能有效偵測並解析小至 70 nm 的顆粒。
• 高解析度： 在解析度方面，它能夠區分粒徑差異僅 10 nm 的微粒（基於二氧化矽微粒），這使得研究人員能夠精確區分大小相似的奈米群體,。
紫光側向散射技術 (Advanced Violet Side Scatter)
2. 先進的紫光側向散射技術 (Advanced Violet Side Scatter) 為了突破散射光偵測的極限，CytoFLEX nano 不僅利用傳統的藍光雷射，還引入了紫光雷射進行側向散射（Side Scatter）偵測，波長越短，對小粒子的散射訊號越強。
• 多重散射通道： 儀器配備了 5 個側向散射偵測通道,。
• 動態範圍優化： 系統將紫光側向散射分為兩個專門的通道以涵蓋不同的粒徑範圍，從而優化信噪比：
◦ VSSC1：專門用於偵測極微小的顆粒（40 nm – 150 nm）。
◦ VSSC2：用於偵測較大範圍的顆粒（80 nm – 1000 nm）。
6 個螢光偵測通道
3. 多參數螢光偵測能力 傳統儀器在奈米尺度下往往難以偵測微弱的螢光訊號。CytoFLEX nano 配備了 4 個平行雷射 與 6 個螢光偵測通道。這使得研究人員能夠：
• 在單一奈米微粒上同時偵測多種螢光標記（例如 CD63, CD81, CD9 等 EV 標記）。
• 即使是表達量極低的目標（Low-abundance targets）也能被有效偵測，且不受抗體背景雜訊的干擾。
4. 嚴格的污染控制與品質保證 (QC) 奈米級偵測極易受到背景雜訊（如灰塵、碎片）的干擾，這在傳統儀器上是一個主要痛點。CytoFLEX nano 透過以下方式確保數據的準確性：
• 自動化清潔程序： 儀器提供多種清洗選項，如逆向沖洗（Back flush）、機載清潔（Onboard clean）以及深度清潔（Customized baseline clean），以去除管路中的殘留物。
• 低攜帶率與高準確度： 系統設計保證樣品間的攜帶率（Carryover）小於 1%，且體積計數準確度大於 90%,。
• 群聚效應（Swarming）控制： 透過監控側向散射的高度與寬度（Side Scatter Height vs Width）以及控制進樣流速（建議每秒 5000 個事件以下），可有效避免因微粒同時通過檢測點而造成的數據誤判,,。
總結類比： 如果將傳統流式細胞儀比作是用肉眼尋找沙灘上的貝殼，那麼 CytoFLEX nano 就像是配備了高倍率顯微鏡與特殊濾鏡的探測器。它不僅能看見肉眼忽略的極微小沙粒（40 nm 靈敏度），還能清楚分辨出兩顆大小幾乎相同的沙粒（10 nm 解析度），並透過多種顏色的光（6 色螢光）來分析這些沙粒的成分。
Exosome (sEVs) 在 CytoFlex nano 上的分析應用
成功偵測70nm的Exosomes
CD9、CD63、CD81 multi-channel
